1、常規方法收集對數期的貼壁細胞或者懸浮細胞于試管中。

 

　　2、根據培養細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細胞數。

 

　　3、將所需數目的細胞懸浮液置于離心管中，收集培養細胞沉淀，棄去離心管中的上清液。

 

　　4、加入適量的本凍存液于離心管中。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

 

　　5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中。

 

　　6、直接將分裝好的細胞凍存管置于溫冰箱中，可長期保存。

 

　　7、若需液氮長期保存，需先置其中至少一天后方可轉至液氮罐中。

 

　　凍存液302-14681的凍存細胞復蘇步驟：

　　1、從冰箱中取出凍存的細胞，立即置于水浴槽中快速解凍。

 

　　2、待凍存管中的細胞混合液*融化后，立即加入細胞培養基于凍存管中與細胞混合，將其中的混合液移至含有該細胞培養基的離心管中，收集凍存細胞沉淀，移去上清液（注意勿將細胞沉淀倒掉）。

 

　　3、加入適量的新鮮培養基，使用移液管緩緩加入細胞沉淀中，輕柔混勻，將混勻好的細胞移至事先準備好的培養容器中。

 

　　4、鏡檢觀察，待細胞狀態恢復后可進行其他研究或者培養處理。

 

　　凍存液302-14681的注意事項：

　　需在超凈臺內使用，以避免雜菌污染。

 

　　需和細菌混勻，否則細菌凍存液無法起到在低溫冷凍條件下對細菌的保護作用。

 

　　對數期細菌凍存效果，但非對數期的或不是新鮮培養的細菌也可以用本細菌凍存液冷凍保存。